一、抗脑水肿药物对脑梗死作用的影像效果评价（论文文献综述）
姜海伟[1]（2021）在《基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究》文中认为目的1.通过对缺血性卒中后认知障碍（PSCI）相关“毒邪”进行具体分类,了解各类毒邪的临床分布特征及总体特性,初步分析黄连解毒汤用于PSCI治疗的可行性。2.基于“毒损脑络”理论,通过黄连解毒汤早期干预PSCIND患者,分析其对认知功能、日常生活能力、实验室指标、中医证候评分的疗效作用,并了解PSCI毒邪的动态变化特点。3.通过实验研究探讨黄连解毒汤干预PSCI的应用时机及部分相关机制,并进一步讨论“毒损脑络”理论对于PSCI病机的合理性。方法1.参考大数据分析结果及“SDSVD量表”中的症状要素,对入选的123例PSCI患者,参考“一般病证+严重、秽浊、迁延邪气”原则制定“PSCI中医毒邪症状要素表”并进行“毒邪”分类,并采用“SDSVD量表”进行中医辨证分型,分析各类毒邪与各中医证型、非特异性症状、发病危险因素、实验室检查（CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy）、TOSAT分型、影像学特征（侧支代偿、梗死部位、脑灌注）及认知功能等方面的分布特征及相关性,并从毒邪相兼情况及热性症状存在情况,评价PSCI相关“毒邪”分类方法的临床基础,分析毒邪的共同特性。分布率的比较采用?2检验,相关性分析采用Pearson相关性及Logistic回归分析。2.将60例PSCIND患者随机分为两组,对照组29例行西医基础治疗,治疗组31例加用黄连解毒汤,比较两组治疗前与治疗后1周、1月、3月、6月的MMSE、Mo CA、NIHSS、ADL、中医证候评分,比较两组治疗前与治疗后1周、1月的CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy值,对治疗后1月、6月的疗效进行相关因素分析,总结分析“毒邪”的动态变化特点。计数资料根据方差检验情况行t检验或秩和检验,疗效相关性分析采用二元Logistic回归分析。3.将多发性脑梗死动物模型随机分为5组:假手术组、24h模型对照组、7d模型对照组、24h黄连解毒汤组、7d黄连解毒汤组。给药28天后对比观察其水迷宫检测结果以了解其认知功能,光镜观察梗死及周围区病理,CD34标记MVD,WB法测Notch信号通路Notch1、Jagged2、Hes1、Stat3蛋白及VEGF蛋白含量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-β、IL-4、IL-10表达情况。各组之间的比较采用单因素方差（one-way ANOVA）分析。结果1.据“PSCI中医毒邪症状要素表”毒邪分类为热毒、痰毒、瘀毒、腑滞浊毒、正虚蕴毒。经Pearson相关性检验,各中医证型与各毒邪分布具有线性相关。Logistic回归分析发现,热毒与无多次脑梗死、无高血压、有糖尿病、侧支代偿差、CRP升高、嗜睡相关;痰毒与卒中到PSCI时间短、高脂血症、侧支代偿差、NSE升高相关;瘀毒与有高血压、吸烟、饮酒、小血管或前循环大血管病变、D-D及FIB升高有关;腑滞浊毒与侧支代偿差、CRP升高、嗜睡有关;正虚蕴毒与卒中到PSCI时间短、Hcy升高有关。整体毒邪与侧支代偿差、卒中到PSCI时间短、CRP升高、Hcy升高有关。各类“毒邪”相互交织,热象存在率平均达79.60%,提示各类“毒邪”存在共性及整体统一性。2.黄连解毒汤治疗PSCIND,在MMSE及Mo CA评分方面治疗组起效更早,可显着提高ADL评分（p<0.05）。对热毒内盛、痰浊阻络、腑滞浊留、气血不足证候评分可在治疗早期产生更积极作用（p<0.05）,可防阴虚阳亢证进一步加重。治疗组在CRP、NSE、D-D方面的改善作用更明显（p<0.05）。二元Logistic回归分析发现,治疗后1月有效性与采用黄连解毒汤,降低热毒内盛评分及清除热毒相关,同时与CRP、NSE值降低、ADL值降低相关。治疗后6月有效性与采用黄连解毒汤、总体毒邪被清除ADL值降低有关。3.动物实验研究结果,在认知功能行为学方面24h及7d黄连解毒汤组定位航行及空间探索能力优于各模型对照组（p<0.05）,24h黄连解毒汤组优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组梗死及周围区存活细胞密度相对较高。各黄连解毒汤组在大脑皮层Notch1、Jagged2、Hes1、STAT3蛋白及IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10表达改善作用均优于各模型对照组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组在Hes1蛋白、IL-6、IL-4的表达优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。各黄连解毒汤组与对照模型组VEGF表达无明显差异（p>0.05）。24h黄连解毒汤组脑组织MVD显着优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。结论1.对毒邪的分类研究发现,各类毒邪在中医辨证分型、非特异性症状、TOSAT分型、实验室指标、影像学特征方面的分布具有一定的趋向性和相关性。多数毒邪相互交织存在,多数存在热性症状,具有整体统一性,采用黄连解毒汤早期干预PSCI具有可行性。2.采用黄连解毒汤干预PSCICN患者可对患者血CRP、NSE、D-D等及中医证候评分产生积极影响,可改善患者认知功能;黄连解毒汤对其整体毒邪具有清除作用,不单纯局限于热毒。其毒邪动态变化特点进一步反应了毒邪的整体性,也反应了随着病情发展进行“辨证论治”的必要性。3.在缺血性卒中急性期,尽早使用黄连解毒汤可减轻多发性脑梗死动脉模型大鼠的认知功能行为学损害,其部分机制是通过抑制Notch信号通路的激活、调节炎性因子及改善梗死周围区域微循环而实现的。“毒损脑络”理论反应了PSCI的病机特点,也反应了PSCI的“防”与“治”的整体一致性。
李中浩[2]（2021）在《痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响》文中研究说明背景:中风病与西方医学体系中的脑血管病相似,主要包括脑梗死和脑出血,具有高发病率、高致残率、高死亡率以及高复发率的特点,是临床中常见的神经科急危重症。静脉注射阿替普酶及近些年发展起来的机械取栓能够有效开通闭塞血管,改善患者临床预后。但部分患者由于存在禁忌症、就医不及时等原因未能接受到这些治疗。因此,需要寻找更多更有效的治疗方案。中医治疗中风病已有悠久的历史,改革开放以来形成了中风病诊断和辨证论治标准。随着对中风病认识的不断加深,王永炎院士强调在中风病中应注意毒邪的致病作用,建议在治疗时加入解毒类方药。痰热清注射液由金银花、黄芩、连翘、水牛角和熊胆粉组成,长于清热解毒,在临床上广泛的应用于呼吸系统疾病的治疗。研究人员发现,伴有肺部感染的中风病患者使用痰热清注射液后,不仅咳嗽、发热等症状得到改善,其神经功能的恢复也较快。痰热清注射液的组方思路与安宫牛黄丸、清开灵注射液、醒脑静注射液相似,因此,从毒邪致病的角度推测痰热清注射液解毒开窍的功效,可能对中风病也有一定的治疗作用。一些早期的临床研究也发现,痰热清注射液能够促进脑梗死和脑出血患者的神经功能恢复。目的:探索痰热清注射对中风病的疗效及其治疗机制。方法:1.在临床研究中,我们采用系统评价和荟萃分析的方法,对已发表的关于痰热清注射液治疗中风病的临床文献进行筛选和分析。检索万方、中国知网、中国生物医学文献数据库和PubMed等数据库中截止到2021年1月1日收录的关于痰热清注射液治疗中风病的随机对照临床试验。按照纳入和排除标准筛选出符合要求的文献,进行荟萃分析,同时对文献的偏倚风险进行评价。2.在实验研究中,我们首先采用网络药理学的方法,对痰热清注射液中有效成分治疗中风病的生物学机制进行探索。根据已发表的文献收集痰热清注射液中的已检测到的化合物成分,计算这些化合物的QED值,选择其中大于0.18的做为潜在有效成分。检索PubChem中这些有效成分的药物靶标。将这些靶标与数据库中检索到的已知治疗中风病的药物靶标做交集,得到痰热清注射液治疗中风病的药物靶标。分析这些药物靶标之间的蛋白-蛋白相互作用关系并进行生物学注释。然后,利用大鼠大脑中动脉栓塞法制作脑梗死动物模型,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色评价不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响。用苏木素-伊红染色和尼氏染色评价梗死模型的病理学特征。最后,使用WB和免疫荧光的方法检测从网络药理学得出的apelin信号通路及其下游的细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达。结果:1.系统评价和荟萃分析中共纳入了 11篇文献,涉及955例患者。荟萃分析结果显示,痰热清注射液对降低中风病或伴肺部感染的患者美国国立卫生研究院卒中量表评分均有一定的帮助作用,与对照组相比具有显着的统计学差异（MD=-5.45,95%CI:-10.82～-0.09。MD=-2.37,95%CI:-3.49～-1.26,P<0.05）。对提高患者功能独立性评分（MD=14.90,95%CI:8.84～20.96,P<0.05）、肢体运动功能（MD=7.39,95%CI:2.74～12.04,P<0.05）有一定的帮助作用,且与对照组相比具有显着的统计学差异。虽然对患者日常生活能力评分的提高有一定的帮助作用,但与对照组相比无显着的统计学差异（MD=12.95,95%CI:-1.02～26.92,P<0.05）。纳入研究的存在较高的偏倚风险,且存在较大的异质性。2.在网络药理学研究中,痰热清注射液的81个有效成分共检索到663个药物靶标,在有效成分-药物靶标网络图中,度值最大的有效成分为绿原酸,度值最大的药物靶标为核因子E2相关因子2。其中有116个为治疗中风病的药物靶标。这116个药物靶标蛋白-蛋白相互作用中重要的靶点有白蛋白、细胞肿瘤抗原p53、白细胞介素-8等。生物学功能注释结果显示,这些靶点涉及胆汁分泌、药物代谢、化学致癌、肝病和apelin信号通路等227个通路;脂肪酸合成与代谢、外来化学物质代谢和细胞对药物反应等3258个生物过程;核受体活性、血红素结合反应、丝氨酸型肽酶活性等442个分子功能;排名靠前的有核苷酸活化蛋白激酶复合物、膜筏、突触后膜等222个细胞组分。在脑梗死大鼠模型中,可见梗死部位水肿,空泡形成,细胞死亡。而腹腔注射液低剂量痰热清注射液（2.5ml/kg,每6小时1次）能够明显减少大鼠脑梗死24小时后的梗死体积,与模型组相比具有显着的统计学差异（P<0.05）。WB结果显示,使用痰热清注射液后APJ/PI3K/AKT/mTOR信号通路的蛋白含量与模型组相比显着增加;凋亡相关蛋白BCL2/BAX 比例显着上升,caspase8蛋白含量显着减少;自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ比例显着下降;NeuN蛋白含量显着增加,GFAP蛋白含量显着减少。蛋白改变具有显着的统计学差异（P<0.05）。结论:痰热清注射液对中风病特别是脑梗死有一定的治疗作用,其治疗脑梗死的机制可能与激活apelin信号通路,抑制细胞凋亡和自噬等有关。但这些研究较为粗浅,需要更高质量的临床和基础研究来明确痰热清注射液对中风病的临床疗效和药理机制。
欧阳波[3]（2021）在《冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究》文中进行了进一步梳理目的:研究冰片配伍黄芪甲苷（Astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ）和三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对大鼠脑缺血/再灌注损伤（Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）后脑组织损伤、神经血管单元主要组分（神经元、星形胶质细胞和微血管）的结构、主要组分特异蛋白--胶质纤维酸性蛋白（Glialfibrillary acidic protein,GFAP）、神经元特异性核蛋白（Neuron specific nuclear,Neu N）、层黏连蛋白（Laminin,LN）、内皮屏障抗原蛋白（Endothelial barrier antigen,EBA）及相关功能蛋白--αII-血影蛋白（αII-Spectrin,αII-SP）、水通道蛋白4（Aquaporin 4,AQP-4）、基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响,探讨其通过Notch信号通路对神经血管单元的保护机制。方法:成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为假手术组（Sham Operation Group,SOG）、模型组（Model Group,MG）、冰片组（Borneol Group,BG）、AST Ⅳ组（AST Ⅳ Group,AG）、PNS组（PNS Group,PG）、AST Ⅳ+PNS组（AST Ⅳ+PNS Group,APG）、冰片+AST Ⅳ+PNS低剂量组（Borneol+AST Ⅳ+PNS Low-dose Group,LDG）、冰片+AST Ⅳ+PNS高剂量组（Borneol+AST Ⅳ+PNS High-dose Group,HDG）、依达拉奉组（Edaravone Group,EG）。EG腹腔注射给药,其他组灌胃给药,2次/d。采用线栓法阻断右侧大脑中动脉（Middle cerebral artery,MCA）,建立大鼠CIRI模型。缺血2h,再灌注后22h,行神经功能缺损评分,TTC染色测定脑梗死体积,HE染色观察大脑缺血皮质区病理形态;免疫组化法检测大脑缺血皮质区GFAP、Neu N、LN、EBA的表达;免疫荧光三标法检测大脑缺血皮质区GFAP、神经丝蛋白200（neurofilament-200,NF-200）、LN的蛋白表达;Westrn blot检测大脑缺血皮质区αII SP、AQP-4、MMP-9、VEGF、Notch1、Notch胞内域（Intracellular domain of Notch,NICD）、Hes1、Delta-like ligand 4（DLL4）蛋白的表达。结果:缺血2h,再灌注22h后,MG出现神经功能缺损、右侧局灶性脑梗死、神经细胞损伤。各药物组神经功能缺损评分、脑梗死体积和神经细胞损伤率显着降低（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。缺血2h,再灌注22h后,免疫组化结果显示,MG的Neu N、LN、EBA阳性细胞显着减少（P<0.01）,GFAP阳性细胞显着增加（P<0.01）;冰片、PNS、AST Ⅳ、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强Neu N、LN、EBA蛋白表达（P<0.05、0.01）,显着降低GFAP蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。免疫荧光三标结果显示,MG的NF-200、LN阳性细胞显着减少（P<0.01）,GFAP阳性细胞显着增加（P<0.01）;冰片、AST Ⅳ、PNS、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着降低GFAP蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强LN蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强NF-200蛋白表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于AST Ⅳ+PNS（P<0.05）。Westrn blot结果显示,MG大鼠缺血皮质区AQP-4、MMP-9蛋白表达显着增加（P<0.05）,αII SP蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,而VEGF、NICD、Notch1、Hes1、DLL4蛋白表达无显着变化（P>0.05）,冰片+AST Ⅳ+PNS能显着上调αII SP、VEGF、NICD、Notch1、Hes1、DLL4蛋白的表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片+AST Ⅳ+PNS能显着下调AQP-4、MMP-9蛋白的表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。结论:1.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后具有脑保护作用,能改善神经功能缺损、降低神经细胞损伤率、减少脑梗死体积,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS。2.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后神经血管单元具有保护作用,可减轻神经元和微血管基底膜损伤、抑制星形胶质细胞过度活化、减轻脑水肿,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS。维持神经血管单元结构完整性,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于AST Ⅳ+PNS。3.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后的脑保护作用机制可能与激活Notch信号通路,上调NICD、Notch1、Hes1、VEGF、DLL4表达,从而发挥对缺血脑组织的保护作用有关。
李中康[4]（2021）在《调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠TLR4/NF-κB通路的影响及证候研究》文中提出目的1.动物实验:观察调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死损伤大鼠体重、血脂水平、神经功能、脑梗死体积及TLR4/NF-κB信号通路相关炎症因子包括:Tol]样受体4（TLR4）、核因子-κB p65（NF-κBp65）、脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-6（IL-6）等表达水平的影响,探讨其对大鼠神经损伤的保护作用和保护脑组织的机制。2.临床研究:探究血脂异常合并缺血性脑卒中患者不同证候间脑卒中病因分型（TOAST分型）特点及TLR4/NF-κB信号通路相关炎症因子包括:TLR4、NF-κBp65、转化生长因子-β激活的激酶1（TAK1）和IL-6等炎症因子水平差异,为中医药防治血脂异常合并缺血性脑卒中提供客观依据及辨证思路,为探究中药作用机理提供数据基础。方法1.动物实验:将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、调脂通脉解毒方低剂量组（以下简称低剂量组）、调脂通脉解毒方中剂量组（以下简称中剂量组）、调脂通脉解毒方高剂量组（以下简称高剂量组）和西药组,每组12只,适应性喂养1周后,尾静脉取血检测血脂。高脂饲料喂养6周制备高脂血症模型后,再次取血检测血脂,用线栓法致大鼠左侧大脑中动脉闭塞（MCAO）建立脑梗死损伤模型,各组分别给予相应浓度的调脂通脉解毒方灌胃,西药组与尼莫地平溶液灌胃,模型组及假手术组用生理盐水灌胃,记录各组大鼠的神经功能缺损状况及评分。灌胃2周后用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色检测脑梗死体积,并取缺血侧大脑皮层组织,采用蛋白质印迹法（Western blot法）检测TLR4和NF-κB p65的表达情况,采用酶联免疫吸附法（Elisa法）检测大鼠脑组织中Lp-PLA2、TNF-α、hs-CRP、IL-6含量。2.临床研究:纳入2019年1月至2019年12月东直门医院及东方医院门诊及住院符合血脂异常合并缺血性脑卒中诊断的患者170例及健康体检者10例,根据四诊信息填写临床病例观察表进行证候评分确定中医证候,分析中医证候分布情况,比较不同中医证候间患者一般资料（包括年龄、性别）、脑卒中病因分型及血清TLR4、NF-κBp65、TAK1、IL-6炎症因子水平差异的特点。结果1.动物实验1)大鼠血脂检测显示:经高脂饲料喂养后,各组大鼠血脂水平较喂养前明显升高（P<0.05）,组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。灌胃后较模型组相比,各剂量组及西药组TC、TG、LDL-C水平均出现降低（P<0.05）,高剂量组HDL-C水平升高（P<0.05）,其中高剂量组较其他组TC、TG和LDL-C水平下降幅度更大（P<0.05）。西药组与低剂量组相比,在TC、TG和LDL-C水平上差异无统计学意义（P>0.05）,在 HDL-C水平上升高（P<0.05）。2)大鼠神经功能缺损结果显示:与模型组相比,调脂通脉解毒方各剂量组及西药组神经功能缺损评分均升高（P<0.05）。与低剂量组相比,中剂量组评分升高（P<0.05）,而高剂量组和西药组较其他各组升高更显着（P＜0.05）,两组之间无明显差异（P>0.05）。3)大鼠脑组织TTC染色显示:与假手术组相比,模型组、中药各剂量组及西药组均出现脑梗死,与模型组相比,各剂量组与西药组脑梗死体积均减少（P<0.05）,与低剂量组相比,中剂量组和高剂量组脑梗死体积减少（P<0.05）;与中剂量组相比,高剂量组脑梗死体积减少（P＜0.05）。高剂量组较西药组差别无统计学意义（P>0.05）。4)Western blot检测结果显示:与低剂量组相比,中、高剂量组及西药组TLR4水平降低（P＜0.05）;与中剂量组相比,高剂量组和西药组TLR4 水平降低（P<0.05）;高剂量组与西药组TLR4水平相比差异无统计学意义（P>0.05）。p-NF-κB p65表达水平比较,与低剂量组相比,中、高剂量组p-NF-κB p65水平降低（P<0.05）,西药组与低剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。各剂量组间比较,高剂量组水平降低最多（P＜0.05）。5)Elisa检测结果显示:Lp-PLA2、TNF-α水平比较,与模型组相比,低剂量组表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,中、高剂量组及西药组水平较模型组下降（P<0.05）,且高剂量组降低最多（P<0.05）。hs-CRP、IL-6水平比较,与模型组相比,各剂量组及西药组表达水平均降低（P＜0.05）,各剂量组间比较,高剂量组hs-CRP、IL-6水平降低最多（P<0.05）,与西药组相比差异无统计学意义（P>0.05）。2.临床研究1)中医证候分布特点:血脂异常合并缺血性脑卒中患者以痰瘀互结证最多（34.70%）,气虚血瘀证其次（21.76%）,其余各证候分布较少,分别为风痰阻络证（17.65%）、肝阳上亢证（14.12%）、痰热腑实证（11.76%）。2)性别、年龄分布特点:血脂异常合并缺血性脑卒中患者男性多于女性,平均年龄67.1±10.8岁。在各年龄段的分布中,其中65～80岁的患者占到48.2%,65岁以下患者占35.9%。40～65岁患者风痰阻络证居多（31.15%）,65～80岁患者以痰瘀互结证最多（53.66%）,80～90岁年龄段的患者气虚血瘀证居多（59.26%）。3)不同证候间脑卒中分型特点:TOAST分型在各中医证候间存在差异（P<0.05）,其中痰瘀互结证多表现为小动脉闭塞性脑卒中,而气虚血瘀证多表现为大动脉粥样硬化性脑卒中,其余各证候间脑卒中分型无明显差异。4)各证候炎症因子水平比较,与正常组相比,各证候组炎症因子表达水平均升高（P<0.05）。其中痰瘀互结证TLR4、TAK1、NF-κBp65表达量最高（P<0.05）,气虚血瘀证其次（P<0.05）。肝阳上亢证和痰热腑实证间差异无统计学意义（P>0.05）。各证候间IL-6水平比较,气虚血瘀证表达量最高（P<0.05）,痰瘀互结证其次,与风痰阻络证相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.调脂通脉解毒方可以调节高脂血症合并脑梗死大鼠血脂水平,改善神经功能评分,减少脑梗死体积,并能够减少脑组织中的NF-κB p65和TLR4蛋白的表达,降低Lp-PLA2、TNF-α hs-CRP、IL-6等炎症因子的水平,减轻炎症性损伤,改善脑梗死后神经功能缺损情况,提示其可能通过调节血脂、抑制TLR4/NF-κB通路对脑梗死后神经功能损伤发挥保护作用。2.血脂异常合并缺血性脑卒中患者的中医证候分布以痰瘀互结证和气虚血瘀证为主,不同证候间脑卒中病因分型存在差异,TLR4、TAK1、NF-κB p65、IL-6等炎症因子在不同中医证候中有不同的水平特点,与中医对血脂异常合并缺血性脑卒中病因病机的认识相符,可作为血脂异常合并缺血性脑卒中分型的客观依据。
田佳乐[5]（2021）在《“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究》文中研究指明缺血性脑卒中是一种因脑动脉栓塞引起的脑血流量短暂或永久减少的脑血管疾病,严重危害人类的身体健康和生活质量。丹参具有活血化瘀之效,降香具有活血理气之功,二者配伍可以活血祛瘀、行气止痛,用于心脑血管疾病的治疗。本课题组前期研究发现丹参-降香药对配伍后产生了一种区别于单用组的代谢产物咖啡酸异丙酯（KYB）,并推测其为丹参-降香药对抗脑缺血的效应物质,目前关于KYB抗脑缺血的作用及机制尚不清楚,本论文基于课题组前期的研究,从血管保护、抗氧化应激的角度初步探讨KYB抗脑缺血的作用及其机制,完成丹参-降香的体内代谢效应物质KYB的药理辨识,具体内容包括以下几个方面:1.本章在建立大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型的基础上,研究香丹注射液和KYB抗脑缺血的作用。采用激光多普勒血流成像灌注仪监测各组大鼠脑血流量的变化;TTC染色（TTC staining）测定脑梗死面积;Western Blot检测IL-Iβ（Interleukin-1 beta）、HIF-1α（Hypoxia-inducible factor-1α）及NF-κB（NF-kappa B,NFκB）的表达。结果显示香丹注射液和KYB高、中剂量组（16、8 mg/kg）可以显着改善脑血流量、降低脑梗死面积,增加HIF-1α的表达、降低IL-Iβ及NFκB的表达,说明香丹注射液和KYB可以通过增加脑血流量,降低炎症反应改善脑缺血损伤,同时,高剂量组的KYB可以发挥与香丹注射液相似的药效,提示KYB是香丹注射液的体内效应物质。2.本章采用离体血管实验初步探讨香丹注射液和KYB舒张血管、改善血管内皮损伤的作用及机制。分别采用乙酰胆碱评价模型后药物干预组大鼠血管的内皮功能、累计浓度药物刺激对正常大鼠血管的张力影响;并观察DAHP（GTPCH1抑制剂）及L-NAME（eNOS抑制剂）对香丹注射液和KYB舒张血管作用的影响;Western Blot测定中动脉中eNOS和iNOS的表达;ELISA试剂盒检测脑组织中NO的含量。结果表明,香丹注射液和KYB可能通过影响人鸟苷三磷酸环化水解酶1-四氢生物蝶呤-内皮型一氧化氮合成酶-一氧化氮（Guanosine triphosphate cyclohydrolase1-tetrahydrobiopterin-endothelial nitric oxide synthase-nitric oxide,GTPCH1-BH4-eNOS-NO）通路舒张血管,发挥抗脑缺血作用。3.建立大鼠脑微血管内皮细胞（RBMEC）氧糖剥夺（Oxygen glucose deprivation,OGD）模型,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的含量、Western Blot检测相关蛋白的表达水平;ELISA试剂盒测定细胞中NO的含量。结果显示香丹注射液和KYB高、中剂量组(10-5、10-8mol/L)可以抑制细胞凋亡,增加eNOS的表达,降低NFκB、p-NFκB及iNOS的表达,提高NO的含量,降低ROS水平。表明香丹注射液和KYB可以改善缺氧缺糖诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡、激活eNOS产生NO有关。
赵慧[6]（2020）在《免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究》文中研究指明目的:脑卒中后脑内炎症反应参与损伤级联扩大及神经功能恶化,但其特点与直接作用尚不明确。本研究通过注射百日咳毒素（pertussis toxin,PTx）增强脑缺血或出血后脑内炎症反应,观察脑内炎症特点、病理变化及临床结局,明确脑卒中后脑内炎症的直接作用。在细胞调节水平,具有获得性免疫功能的固有淋巴细胞（innate lymphoid cell,ILC）亚群对脑卒中的免疫调节作用与机制尚不明确。因此我们研究以2型为代表的ILC及其调节因子白介素（interleukin,IL）-33对脑卒中的影响,以明确脑卒中后免疫细胞介导的炎症反应特征与机制,为免疫调节治疗提供实验依据。方法:第一部分:野生型C57BL/6小鼠100只,雄性,予以分为5组,假手术组（Sham组）、脑缺血组（MCAO组）、PTx处理脑缺血组（20μg/kg PTx+MCAO组）、脑出血组（ICH组）、PTx处理脑出血组（20μg/kg PTx+ICH组）（随机数字法）,每组20只。采用线栓法对野生型C57BL/6小鼠建立60分钟大脑中动脉缺血再灌注模型。采用胶原酶微量泵注射法制备野生型C57BL/6小鼠脑出血模型。应用改良的神经功能缺损评分量表、转棒疲劳实验检测第1-3天各组小鼠的神经功能损伤情况;用流式细胞术对第3天各组小鼠的病灶侧脑组织免疫细胞浸润情况进行分析,包括小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞;小动物活体成像技术对第3天各组小鼠中枢活性氧进行标记示踪;免疫荧光染色的方法对内皮细胞与紧密连接蛋白ZO-1、内皮细胞与紧密连接蛋白Claudin-5共染,观察第3天各组小鼠的血脑屏障通透性。第二部分:野生型C57BL/6小鼠40只,雄性,予以分为2组,假手术组（Sham组）与脑缺血组（MCAO组）（随机数字法）,每组20只。流式细胞分析比较各组小鼠MCAO模型制备后第3天脑、脾、外周血的ILC2计数;免疫荧光染色法分析少突胶质细胞、星形胶质细胞中IL-33表达水平。应用药理学干预和转基因动物,研究删除、转输或活化ILC2细胞对神经功能评分和梗死体积的影响:分组1)野生型C57BL/6小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与删除ILC2组（anti-CD90.2组）（随机数字法）,每组10只。2)应用免疫缺陷的Rag2-/-γc-/-小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与ILC2转输组（ILC2组）（随机数字法）,每组10只。3)野生型C57BL/6小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与IL-33处理组（IL-33组）（随机数字法）,每组10只。应用小动物磁共振成像仪T2成像比较各组小鼠MCAO模型制备后第1、3、7天脑梗死病灶体积;改良的神经功能缺损评分量表、转角实验比较各组小鼠MCAO模型制备后第1、3、7天神经功能损伤情况。结果:第一部分:（1）各组小鼠神经功能损伤情况:与MCAO组相比,第1-3天20μg/kg PTx+MCAO组小鼠改良的神经功能缺损评分明显增高（*P<0.05）,转棒疲劳实验小鼠停留的时间明显减少（*P<0.05）。与ICH组相比,20μg/kg PTx+ICH组小鼠改良的神经功能缺损评分明显增高（*P<0.05）,转棒疲劳实验的时间明显减少（*P<0.05）。（2）各组小鼠中枢免疫细胞浸润分布:与Sham组相比,MCAO组与ICH组小鼠脑内小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞显着增多（*P<0.05）。分别与MCAO组、ICH组相比,20μg/kg PTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组小鼠中枢内B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞明显增多（*P<0.05）。此外,分别与MCAO、20μg/kg PTx+MCAO组相比,ICH、20μg/kg PTx+ICH组小鼠中枢内中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD8+T细胞明显减少（*P<0.05）。（3）各组小鼠脑氧化应激对比:与Sham组相比,MCAO组、ICH组第3天的活性氧产生显着增多,氧化应激水平显着增高（*P<0.05）。20μg/kg PTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组的氧化应激水平较未处理组明显增高（*P<0.05）。（4）各组小鼠血脑屏障染色:与Sham组相比,MCAO组、ICH组第3天的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达显着减少。分别与MCAO组、ICH组相比,20μg/kgPTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达进一步减少。第二部分:（1）与Sham组相比,MCAO组野生型C57BL/6小鼠脑内ILC2计数明显增多（**P<0.01）,脾与外周血中ILC2计数明显减少（*P<0.05）,提示脑缺血后ILC2向中枢浸润增多。（2）为研究ILC2是否影响脑卒中病理进程,我们利用抗CD90.2单抗删除ILC2及将ILC2转输至Rag2-/-γc-/-小鼠（无T、B、NK细胞）体内,经核磁影像与神经功能评分阐述ILC2对脑卒中预后的影响。实验发现,在脑缺血再灌注后第1-3天,抗CD90.2抗体删除ILC2显着增加小鼠脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。而通过将ILC2转输至Rag2-/-γc-/-小鼠可有效降低脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。上述结果表明ILC2对缺血性脑卒中具有保护作用。（3）继而,我们利用病理切片染色发现,少突胶质细胞是表达IL-33的主要细胞,且在脑缺血再灌注后表达显着上调（*P<0.05）。推测胶质细胞来源的IL-33可能是维持脑部ILC2细胞存活与活化的主要细胞。缺血性脑卒中小鼠体内给予IL-33能够扩增ILC2数量,减小脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。结论:第一部分:PTx引起的系统炎症反应可进一步加重小鼠脑卒中后神经功能损伤程度体现为:中枢内小胶质细胞活化,髓系与淋巴细胞的浸润增多;PTx引起的免疫炎症过程可能与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞在中枢内浸润增高有关,而与小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞的中枢浸润关系不密切。相比ICH模型,MCAO模型以中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD8+T细胞的中枢浸润为主,提示天然免疫可能主要参与了脑缺血急性期损伤加重。PTx对小鼠脑内活性氧的产生及其氧化应激水平有进一步放大作用。PTx诱发的炎症反应下调脑卒中后第3天血脑屏障的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达,使其破坏加重,进一步扩大脑内免疫炎症反应水平。第二部分:MCAO小鼠脑内有大量的ILC2浸润,而外周ILC2显着减少,提示外周ILC2可能在脑缺血后迁移至脑损伤部位。通过删除或转输ILC2的相关实验提示ILC2可减轻脑缺血再灌注小鼠神经功能损伤和病灶体积,证明ILC2对缺血性脑卒中发挥保护作用。IL-33可在体内扩增ILC2,表明脑内胶质细胞来源的IL-33可能是维持ILC2细胞活化的关键分子。ILC2减小梗死体积、帮助神经功能的修复可能是通过其上游的IL-33调节作用完成,其中少突胶质细胞可能是IL-33的主要来源。
丁永胜[7]（2020）在《基于活血谱效相关的三七质量评价研究》文中进行了进一步梳理目的三七为五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根及根茎,具有散瘀止血,消肿定痛的功效。因其有着活血止血双向作用的特性,在医疗保健中应用越来越广泛。中药质量评价方法是控制中药质量、保障药物疗效的有效手段。随着科学技术的发展,三七质量评价研究越来越深入,解决了三七质量控制中的大部分问题,但仍存在一些难题尚未解决,如:因三七有效成分群尚未完全明确,现建立的以化学成分含量为依据的质量评价方法无法完全反映三七真实药效;以传统性状特征为依据的三七商品规格等级划分方法缺乏系统的现代化学及药理学数据支撑。通过前期研究及文献查阅了解到三七活血有效成分主要为三七总皂苷,而三七总皂苷具体组成尚未完全阐释清楚,三七总皂苷含量与三七性状特征之间的关系也无统一定论,因此,仅以几个三七皂苷单体含量为评价指标的质量控制方法存在一定不足,以三七性状特征划分三七商品规格等级缺乏科学依据。基于上述背景,本研究拟收集50批次不同产地、不同商品规格的三七,以活血功效为切入点,利用谱-效相关法深入研究三七活血有效成分群组成,以三七有效成分群含量为依据,结合三七谱-效关系,利用灰色关联分析法建立能够反映三七真实药效的质量评价方法,建立以活血药效为依据的三七商品规格等级划分新方法。方法1三七资源调查及实验样品制备通过文献检索确定三七资源调查及实验样品收集范围,采取文献调查、实地调查及走访调查的方式了解三七种植资源分布和市场销售的情况并收集产地信息明确的三七样品,以70%乙醇为溶剂采用加热回流法提取所收集到的三七样品,为后续研究做准备。2三七药物谱研究取有代表性的14批次三七药材,有目的地制备谱图差异明显的14批次三七样品,在前期研究基础上,通过优化色谱条件,提升仪器分析检测化学成分的能力,建立三七的HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行定量/半定量分析,得到三七的药物谱。3三七活血药效谱研究采用体外毛细管凝血实验,观察具代表性的14批次三七对大鼠毛细管凝血时间的影响,初步评价14批次三七活血作用强弱。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）缺血再灌注损伤模型,通过观测具有代表性的14批次三七药材对模型大鼠脑梗死面积百分比、脑失水率、脑体指数的影响,进一步评价三七活血作用强弱。最终得到三七抗毛细管凝血时间药效谱和抗脑缺血再灌注损伤药效谱。4三七活血有效成分群的筛选采用熵值法分别计算大鼠MCAO缺血再灌注损伤实验的综合药效指标、三七活血作用综合药效指标。运用偏最小二乘法,将药物谱分别与单一药效指标和综合药效指标进行关联分析,筛选得到三七的抗毛细管凝血有效成分群、抗脑缺血再灌注损伤作用的有效成分群和三七活血作用的有效成分群。5基于活血功效的三七质量评价方法的建立采用HPLC法检测50批次不同产地、不同商品规格的三七活血有效成分群含量,通过灰色关联法结合活血有效成分群各指标药效系数,构建三七质量评价模型,综合评价三七质量,并依据相对加权关联度大小,设置商品规格等级阈值,划分三七商品规格等级,建立三七质量评价及商品规格等级划分方法。结果1三七资源调查及实验样品制备三七种植地主要分布于云南文山州、红河州和玉溪地区,广西仅德保、坡洪等地有少量种植。市场销售三七主产于云南,集散于文山。本研究共收集到50批不同产地、不同商品规格的三七样品,对所收集到的样品采用加热回流提取法制备三七70%乙醇提取物干膏,发现所收集到的50批次三七样品出膏率范围为24.41%～50.31%,说明各批次三七化学成分含量或种类存在一定差异,可作为后续实验研究材料。2三七药物谱研究通过对14批次三七进行HPLC分析,建立了三七的HPLC指纹图谱,共确定了 23个共有成分,指认了其中 12 个成分（N-R1、G-Rg1、G-Re、20（R）N-R2、G-Rg2、G-Rh1、G-Rb1、G-Rc、G-Rb2、G-Rd、N-Ft1、20（R）G-Rh2）,均为皂苷类化合物。对已指认的 12个共有成分和11个未指认成分分别进行定量及半定量分析,获取了三七的药物谱。14批次三七12个共有皂苷类成分含量分别在0.61%～1.29%、3.90～5.90%、0.42%～1.23%、0.06%～0.11%、0.21%～0.61%、0.14%～0.27%、1.82%～3.70%、0.03%～0.07%、0.08%～0.21%、0.75%～1.30%、0.03%～0.15%、0.04%～0.15%范围内。以上结果说明14批次三七化学成分含量存在较大差异,可继续进行后续实验研究。3三七活血药效谱研究研究结果表明:14批次三七的活血效果确实存在显着性差异。体外毛细管凝血实验显示,14批次三七凝血时间范围为59.17～97.08 s,与空白组比较均可显着延长大鼠毛细管凝血时间;大鼠脑缺血再灌注实验结果显示,14批次三七脑梗死面积百分比、脑失水率及脑体指数范围分别为5.87%～32.08%、79.76%～81.45%、0.59%～0.66%,14批次三七给药组各药效指标与模型组比较,差异均具有统计学意义。以上结果为谱-效相关法研究三七活血有效成分群提供了丰富的药效学信息。4三七活血有效成分群的筛选采用熵值法,建立了三七的抗MCAO脑缺血再灌注损伤综合药效谱和活血作用综合药效谱。药物谱-抗毛细管凝血药效指标相关结果表明:23个共有化合物中,20个化合物对延长毛细管凝血时间起正向作用。已指认的化合物中,G-Rb1、G-Rb2和G-Re对延长毛细管凝血时间贡献度最高,（R）N-R2、G-Rh1对该指标有明显的负向作用。药物谱-抗MCAO脑缺血再灌注损伤药效指标相关结果表明:23个共有化合物中17个成分对降低大鼠脑梗死面积起正向作用;15个成分对降低大鼠脑失水率起正向作用;9个成分对降低大鼠脑体指数起正向作用。药物谱-抗脑缺血再灌注损伤综合药效谱相关结果表明,23个共有成分中18个成分对减轻脑缺血再灌注损伤起正向作用,已指认的化合物中,G-Rb2、G-Rc、G-Rd对抗脑缺血再灌注损伤贡献度最大,（R）N-R2、G-Rh1、N-Ft1对脑缺血再灌注损伤起负向作用。药物谱-活血作用综合药效指标相关结果表明:23个共有成分中17个化合物对活血综合药效指标起正向作用。已指认的化学成分中,G-Rb2、G-Rc、G-Rd、N-R1、G-Rb1五种成分对三七活血作用所作贡献较大,G-Rh1、（R）N-R2、N-Ft1对三七活血作用有明显的负向影响。无论体外、体内实验G-Rh1、（R）N-R2均对三七活血指标表现出明显的负向影响,N-Ft1对脑缺血再灌注损伤和综合药效也表现出明显的负向影响,说明G-Rh1、（R）N-R2、N-Ft1可能存在潜在的促凝作用。5基于活血功效的三七质量评价方法的构建利用HPLC法对50批次三七进行了活血有效成分的定量/半定量分析,采用灰色关联法成功构建三七质量评价模型,建立了三七商品规格等级划分新方法。50批次三七相对加权关联度大小范围为0.4170～0.5210,相对加权关联度越大,三七质量越优。人为设置三七商品等级相对加权关联度阈值,初步将50批次三七划分为4个等级（Ⅰ级:相对加权关联度≥ 0.5000;Ⅱ级:0.5000>相对加权关联度≥ 0.4600;Ⅲ级:0.4600>相对加权关联度≥0.4200;Ⅳ级:0.4200>相对加权关联度）,检测的50批三七中Ⅰ级8批次,Ⅱ级14批次,Ⅲ级26批次,Ⅳ级2批次。结论1.本研究建立了基于谱-效相关的三七活血作用有效成分群的快速筛选方法,为全面揭示三七有效成分群奠定了基础,也为其他中药材有效成分群的辨识提供了借鉴。2.首次采用熵值法综合体外、体内活血药效指标,利用谱-效相关法明确了三七活血有效成分群组成,为三七质量评价研究、临床合理使用和资源开发利用提供了参考。3.以有效成分的药效系数为权重、含量为依据,采用灰色关联分析法建立了能够反映三七药效的质量评价方法和三七商品规格等级划分新方法,为三七及其他多指标成分中药材的质量评价方法研究提供了参考。
任杰[8]（2020）在《心脑宁胶囊对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究》文中指出脑卒中作为缺血性脑血管病,其发病迅速,治疗窗口期短,还可能会造成患者行为能力丧失甚至死亡,严重危害人类健康。溶栓治疗在脑卒中急性期占主导地位,然而随着血管复通,血流恢复,产生了更为严重的“缺血再灌注损伤”。由于脑缺血再灌注损伤是多分子、多机制相互影响的病理生理过程,寻找积极有效的治疗方案具有重要意义。现代药理学研究显示,中药多成分、多靶点的特性在防治心脑血管疾病方面具有显着优势。心脑宁胶囊由银杏叶、小叶黄杨、丹参、大果木姜子、薤白配伍而成,对心血管疾病具有良好的临床疗效,但在脑血管疾病领域研究较少,相关机制研究几乎是一片空白。因此探究复方中药心脑宁胶囊对脑缺血再灌注损伤的保护作用,挖掘其作用机制具有一定的研究意义。目的:本论文选取心脑宁胶囊（XNN）作为研究对象,分别从行为学、影像学以及组织病理学对小鼠脑缺血再灌注模型进行评估,旨在探究其对急性脑缺血再灌注损伤的保护作用。通过网络药理学分析心脑宁胶囊治疗缺血性卒中的重要靶点以及相关机制通路。从动物水平到分子水平系统地探究心脑宁胶囊改善脑缺血再灌注损伤的作用机制,为其用于临床缺血性卒中的治疗提供理论依据和实验参考。方法:本研究选用雄性ICR小鼠作为实验对象,在诱导缺血再灌注损伤之前采取预给药的形式处理。心脑宁胶囊组每日按3g/kg灌胃XNN内容物混悬液;阳性药组每日按9mg/kg尾静脉注射依达拉奉（YDLF）;模型组以及假手术组每日灌胃生理盐水,持续7天。采用线栓闭塞大脑中动脉的方式建立小鼠脑缺血/再灌注损伤模型。选择缺血时间为30min,再灌注时间为24小时。即相关数据的检测,组织的取材,均在缺血再灌注24小时左右进行。首先从动物整体水平出发,采用Bederson神经行为学评分,在造模苏醒后立即进行神经功能评价。排除掉未造成缺血损伤（0分）或者损伤过重（5分）的样本,使入组小鼠神经功能损伤尽可能处于同一水平。在缺血灌注24h再进行神经行为学评分,评价神经功能损伤进展情况。后续利用小动物活体成像设备Micro-CT结合X线对比剂碘海醇注射液进行扫描,再通过三维重建技术重现各组小鼠脑中线,计算偏移量,判断脑水肿情况;利用TTC染色法评价小鼠脑梗死面积改善情况。再灌注24小时取脑组织并切片,进行TTC染色并拍照,计算梗死面积并统计梗死百分比;利用H&E染色技术评价各组小鼠缺血再灌注损伤后纹状体和海马区组织病理学差异。完成药效学评价之后,为了探寻心脑宁胶囊对脑缺血再灌注损伤最主要的作用机制,我们运用网络药理学IPA分析,将XNN主要活性成分与缺血性卒中相关靶点相结合,得到化合物-靶点-通路相关数据,分析出其最有可能的作用通路,以及该通路上的关键靶点,并以此为切入点进行机制探究与验证。我们利用免疫印迹法测定了小鼠脑组织NF-κB p65总蛋白的表达;借助免疫组织化学染色法,分析并评价了NF-κB p65蛋白在脑组织细胞核中的表达情况;最后我们利用RT-PCR技术,检测各组NF-κB通路下游相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA水平。完成了基于炎性反应的XNN抗脑缺血再灌注损伤的机制探究。结果:在模型的建立与评价方面,各手术组与假手术组之间表现出显着性差异,且各手术组之间无显着性差异,表明手术均成功诱导缺血损伤,平行性较好。在24h时,XNN组和YDLF组神经行为学评分均显着低于模型组（p<0.01）。Micro-CT影像结果显示,心脑宁组与YDLF组脑中线偏移距离均显着小于模型组（p<0.01）。在组织病理学评价方面,TTC染色结果显示,XNN组梗死面积显着小于模型组（p<0.01）,YDLF效果更为明显（p<0.001）;HE结果显示,XNN组及YDLF组相较模型组细胞分布与排列更为规整,染色较为正常,有一定的细胞间质水肿现象。网络药理学分析显示,XNN干预脑缺血再灌注损伤最有可能通过神经炎症信号通路发挥作用,且最终的核心靶点分析显示与Rel A（p65）相关性最高。蛋白免疫印迹结果显示,XNN组NF-κB p65总蛋白的含量较模型组显着降低（p<0.001）;免疫组织化学染色结果显示,模型组细胞核存在大量NF-κB p65阳性表达,XNN组阳性细胞数较模型组有显着性差异（p<0.01）,但若采用积分光密度测量法,与模型组之间的差距更为显着（p<0.001）;RT-PCR结果显示,XNN组NF-κB下游相关的炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA的水平较模型组均有一定的下降趋势,其中IL-1β最为明显（p<0.05）。结论:本研究发现XNN对脑缺血再灌注损伤有保护作用。其能够改善MCAO模型损伤后的神经功能障碍;可以保护血脑屏障,抑制继发性脑组织水肿的进展;能够挽救缺血半暗带,减小脑梗塞病灶的范围;能够改善病理所呈现的组织及细胞损伤;能够抑制脑缺血再灌注损伤后NF-κB p65的表达,减少其下游相关炎症因子m RNA的水平。相关网络药理学分析结果也互相验证了这一点。由此我们推断,XNN能够通过下调NF-κB及其通路相关炎症因子的表达发挥抗脑缺血/再灌注损伤的作用。
祁琳[9]（2020）在《基于代谢组学探索大黄黄连泻心汤抗脑缺血的分子作用机制》文中研究说明脑中风目前作为全球第二大致死性疾病,以地区性高发病率、发病后高致残率、治疗后高复发率的特性,对国民健康构成极大威胁。伤寒论中古方大黄黄连泻心汤在近代药理学研究中有良好的脑保护作用,而大黄与黄连于单行用药上同样具有突出表现且在临床方面应用频次较高。且现代中医研究“毒损脑络学说”病机备受推崇,该学说论证热毒是引发中风的关键病因之一,其中清热泻火解毒药物可明显缓解病情。鉴于大黄黄连泻心汤在临床中对脑保护作用良好,且大黄、黄连在单行用药上应用频次较高,却对机体内相关的分子机制并不明确。本文将以大黄黄连泻心汤作为研究对象,对局灶脑缺血小鼠进行灌胃给药,结合神经系数评分、脑梗死面积及脑含水量等药效指标,再将代谢组学技术引入抗脑缺血的机制研究当中,通过对不同状态下小鼠血清和脑组织的检测、数据的模式识别,探究大黄黄连泻心汤的抗脑缺血机制,挖掘相关的内源性代谢物和代谢通路,探讨其相关分子机制,为中药预防脑缺血提供了新的思路。主要研究方法及结果如下:（1）以线栓法建立局灶脑缺血小鼠模型,通过持续七天预防式给药灌胃。观察小鼠生命状态并根据Longa神经功能评分法对小鼠神经功能进行程度区分。采取TTC染色法并通过ImageJ-Pro PLUS6.0软件图像识别模式对脑梗死面积进行测定,结合脑含水量测定方法对脑水肿程度等多指标联合,对大黄黄连泻心汤抗脑缺血作用进行评价,结果证实大黄黄连泻心汤确具有抗脑缺血效果。浓度为2.4g/ml的大黄黄连泻心汤治疗效果并无显着性,而给药剂量为1.2g/ml与0.6g/ml表现为明显的良好预防效果,表达为肢体神经功能的恢复,脑梗死面积以及脑含水量较模型组明显缓解,并提示大黄黄连泻心汤的量效关系呈非线性量效关系。（2）根据不同剂量大黄黄连泻心汤药效学指标评价选取有效剂量为1.2g/ml与0.6g/ml。运用GC-MS技术对不同状态下的小鼠的血清和脑组织进行分析测定,并结合NIST08数据库和HMDB数据库等对内源性代谢物进行识别。采用MetaboAnalyst4.0软件通过模式识别对血清和脑组织数据进行分析主成分分析、偏最小二乘分析、多元ROC曲线探索性分析等方法,证实局灶脑缺血小鼠造模成功复制,及局灶脑缺血模型对小鼠机体代谢产生干扰作用。对不同状态下的小鼠数据样本分析推证大黄黄连泻心汤具备干预小鼠的缓解神经功能损伤功能,并提示小鼠机体具有缓和为正常体征状态趋势。对模型组与大黄黄连泻心汤组的小鼠血清和脑组织液比较其内源性物质的相关性,发现假手术组、大黄黄连泻心汤中低剂量组与模型组相比,内源性物质的相对含量的变化具有相似性,即与假手术组对比,模型组的差异性大于大黄黄连泻心汤组。根据VIP>1结合非参数检验P<0.05筛选出血清、脑组织中的12、7种差异性代谢物;运用Pathway Analysis数据库对差异性代谢物进行拓扑分析,选择Impact>0.10的通路,对血清和脑组织差异性代谢产物分析发现9、2个代谢通路,推测大黄黄连泻心汤发挥干预作用可能与谷氨酰胺和谷氨酸代谢、花生四烯酸代谢、淀粉和蔗糖代谢等通路有关;通过Cytoscape构建模块化结构对代谢内源物进行相关性分析。对血清和脑组织差异性代谢产物的相关性分析和模块化分析分别发现3、4个模块之间关系密切,大黄黄连泻心汤发挥干预作用可能与血清和脑组织3、4个模块代谢物的差别相关。
刘智美[10]（2020）在《通脑丸治疗痰瘀阻络型缺血性脑卒中恢复期的临床观察》文中提出目的:本课题通过观察通脑丸对缺血性脑卒中恢复期（痰瘀阻络型）患者的临床疗效及相关量表、血清指标的变化,客观评价其疗效与安全性。方法:随机将选取的80例符合标准的患者分为2组（各40例）,均予基础治疗,治疗组与对照组分别合用通脑丸与脑心通胶囊。疗程为4周。分别于治疗前后认真填写病例报告表,观察患者中医症候评分及各项量表评分的变化,同时检测血脂四项HCY、hs-CRP水平,并将两组的数据进行分析。结果:1.治疗前两组资料比较:治疗前两组患者的基础资料、各项量表评分与实验室指标比较均无统计学差异（P>0.05）,说明对照组与治疗组之间具有可比性,可进行后续的临床观察;2.疗效比较:治疗结束后治疗组的临床疗效与中医症候疗效的总有效率分别是95%、92.5%,对照组的临床疗效与中医症候疗效的总有效率分别是80%、80%,且2组间的比较具有统计学差异（P<0.05）,说明通脑丸治疗该病的临床与中医症候疗效优于脑心通胶囊;3.各项量表评分比较:相较于治疗前,治疗后2组NIHSS评分均明显下降,而ADL评分、FMA评分均升高,2组组内治疗前、后比较具有统计学差异（P<0.05）,同时治疗后治疗组与对照组2组组间进行比较时有统计学差异（P<0.05）,说明通脑丸对该病的治疗效果较脑心通胶囊的效果更佳;4.实验室指标的比较:相较于治疗前,治疗后血清HCY、hs-CRP、TC、TG、LDL-C水平降低,血清HDL-C水平升高,治疗前后的2组组内比较具有统计学差异（P<0.05）,治疗后2组组间的血清HCY、hs-CRP水平进行比较具有统计学差异（P<0.05）,治疗后2组组间的血清血脂四项水平进行比较无统计学差异（P>0.05）,说明通脑丸与脑心通胶囊在调节缺血性脑卒中恢复期患者的血脂方面疗效相当,而在抗炎、抗氧化方面通脑丸优于脑心通胶囊。结论:通脑丸可有效改善缺血性脑卒中恢复期（痰瘀阻络型）患者的临床疗效;能显着改善患者的中医症候积分及各项量表评分;调节患者的血脂水平,降低HCY、hs-CRP水平,无明显毒副作用。
二、抗脑水肿药物对脑梗死作用的影像效果评价（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、抗脑水肿药物对脑梗死作用的影像效果评价（论文提纲范文）
（1）基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分:对PSCI相关中医“毒邪”分类的研究 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.观察指标及研究方法 |
| 4.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.入选患者中医证型及有关实验室指标的总体分布情况 |
| 2.各中医证型与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 3.毒邪的分类与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 4. 各中医证型与相应毒邪的分布特征及相关性 |
| 5. 各类毒邪相兼情况分布特征 |
| 6. 各类毒邪中热性症状存在情况 |
| 7. 各类毒邪与所观察要素的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的中医证候学研究 |
| 2.对PSCI毒邪的分类定义 |
| 3.对PSCI中医证型及毒邪分类研究结果的解读及探讨 |
| 4.对于“素毒”与“新毒”的理解 |
| 5.PSCI毒邪的整体统一性及黄连解毒汤治疗的可行性 |
| 6.本研究需要进一步延伸的方向 |
| 第二部分:早期应用黄连解毒汤对PSCIND患者的疗效观察 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.分组情况及治疗方法 |
| 4.观察指标及研究方法 |
| 5.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.黄连解毒汤对认知功能MMSE评分的影响 |
| 2.黄连解毒汤对认知功能MoCA评分的影响 |
| 3.黄连解毒汤对神经功能NIHSS评分的影响 |
| 4.黄连解毒汤对日常生活能力ADL评分的影响 |
| 5.黄连解毒汤对各中医证候评分的影响 |
| 6.黄连解毒汤对实验室指标的影响 |
| 7.对治疗后1 月、6 月疗效的相关因素分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的治疗与“毒损脑络”学说 |
| 2.黄连解毒汤在脑血管病中的应用 |
| 3.导师组有关黄连解毒汤在认知障碍方面的研究基础 |
| 4.对神经、认知功能及ADL评分的影响作用分析 |
| 5.对各中医证候评分及有关毒邪的动态影响作用分析 |
| 6.对相关实验室指标的影响作用分析 |
| 7.本研究的意义及仍需解决的问题 |
| 第三部分:黄连解毒汤对脑梗死动物模型认知功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 实验动物与方法 |
| 1.实验动物 |
| 2.试剂及仪器 |
| 3.多发性脑梗死大鼠动物模型的制作 |
| 4.随机分组及给药 |
| 5.大鼠脑组织取材 |
| 6.指标检测及方法 |
| 7.统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 各组大鼠的行为学认知功能检测 |
| 2. 各组大鼠皮层组织 HE 染色病理检查 |
| 3. 各组大鼠脑组织梗死周围区 MVD 检测 |
| 4.各组大鼠脑皮层组织Notch信号通路及VEGF蛋白检测 |
| 5.各组大鼠脑皮层组织炎性相关因子的检测 |
| 讨论 |
| 1.对PSCI发生机制的认识及所观察指标的选择 |
| 2.黄连解毒汤对于脑缺血及PSCI影响的可能机制 |
| 3.对PSCI相关信号通路的选择 |
| 4.动物造模方法的选择 |
| 5.对实验分组方法的选择 |
| 6.对实验结果的解读及分析 |
| 7.本研究的意义及有待延伸的方向 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 文献综述:“毒损脑络”学说与卒中后认知障碍 |
| 参考文献 |
| 附录2 血管性痴呆中医证候诊断量表(SDSVD) |
| 附录3 PSCI中医毒邪症状要素表 |
| 附录4 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附录5 简易智能精神状态检查量表(MMSE) |
| 附录6 日常生活能力(ADL)评分量表 |
| 附录7 大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS) |
| 附录8 各组实验动物水迷宫活动轨迹图例 |
| 附录9 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区 HE 染色病理结果 |
| 附录10 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区微血管密度情况 |
| 在校期间发表的论文 |
| 在读期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（2）痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从毒论治中风病的研究进展 |
| 一、中风病中西医论治现状 |
| 二、从毒论治中风病的理论基础 |
| 三、解毒法治疗中风病的当代实践 |
| 四、常用解毒类方药治疗中风病的现代研宄 |
| 五、总结和展望 |
| 六、参考文献 |
| 综述二 痰热清注射液成分、治疗机制及临床应用的研究进展 |
| 一、痰热清注射液出自名家，历经考验，疗效确切 |
| 二、痰热清注射液含有多种化学成分 |
| 三、痰热清注射液的药理作用及安全性研究进展 |
| 四、痰热清注射液的临床应用进展 |
| 五、痰热清注射液从解毒切入治疗中风的研宄现状和展望 |
| 六、参考文献 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 痰热清注射液治疗中风病的系统评价和荟萃分析 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验研究 |
| 研究一 利用网络药理学探讨痰热清注射液治疗中风病的生物学机制 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究二 不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究三 痰热清注射液对apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文索引 |
| 前言 |
| 第一部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠行为学及病理形态学的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量确定及药物配制 |
| 1.3 试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 MCAO模型的评价 |
| 2.2 Bederson神经功能评分比较 |
| 2.3 Garcia JH神经功能评分比较 |
| 2.4 脑梗死体积的比较 |
| 2.5 脑组织病理形态的比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 实验模型及动物的选择 |
| 3.2 中医对缺血性脑卒中的认识及中药治疗 |
| 4 小结 |
| 第二部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经血管单元特异性结构蛋白及其结构完整性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NeuN表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Laminin表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区GFAP表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后 脑缺血皮质区EBA表 达的影响 |
| 2.5 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NVU的主要组分结构关系的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Neu N、 EBA和Laminin及 GFAP表达的影响 |
| 3.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NVU主要组分的结构关系的影响 |
| 4 小结 |
| 第三部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经血管单元主要组分相关功能蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区αII-Spectrin表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区AQP-4表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区VEGF表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区MMP-9 表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区αII-Spectrin、AQP-4、MMP-9及VEGF表达的影响 |
| 4 小结 |
| 第四部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠损伤局部Notch信号通路的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Notch1表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NICD表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Hes1 表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区DLL4 表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Notchl、NICD、Hesl及 DLL4 表达的影响 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录A 个人简历 |
| 文献综述 |
| 文献综述一 基于神经血管单元的缺血性脑卒中相关信号通路研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 黄芪、三七及冰片抗脑缺血的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠TLR4/NF-κB通路的影响及证候研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 血脂异常合并缺血性脑卒中研究进展 |
| 1 血脂异常与缺血性脑卒中的流行病学现状 |
| 2 血脂异常引起动脉粥样硬化 |
| 3 血脂异常与脑卒中关系密切 |
| 4 缺血性脑卒中的调脂治疗 |
| 5 血脂异常合并缺血性脑卒中治疗中存在的问题 |
| 6 缺血性脑卒中与炎症反应 |
| 7 TLR4/NF-κB信号通路及炎症因子 |
| 8 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药防治血脂异常合并缺血性脑卒中的研究进展 |
| 1 中医药对血脂异常合并缺血性脑卒中的认识 |
| 2 中医药对血脂异常合并缺血性脑卒中的治疗 |
| 3 中医药在现代研究中发现的新作用 |
| 4 中医药针对疾病治疗难点发挥的作用 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠TLR4/NF-κB通路影响的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验动物 |
| 2 药物与试剂 |
| 3 主要仪器 |
| 4 实验器械 |
| 5 动物饲养 |
| 6 实验方法 |
| 7 取材 |
| 8 观察与检测指标 |
| 9 统计方法 |
| 结果 |
| 1 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠体重的影响 |
| 2 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠血脂水平的影响 |
| 3 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠神经功能的影响 |
| 4 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠脑梗死体积的影响 |
| 5 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠p-NF-κB p65蛋白表达的影响 |
| 6 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠TLR4蛋白表达的影响 |
| 7 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠Lp-PLA2、TNF-α水平的影响 |
| 8 调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠hs-CRP、IL-6水平的影响 |
| 讨论 |
| 1 调脂通脉解毒方对脂质代谢的影响 |
| 2 调脂通脉解毒方对脑梗死体积的影响 |
| 3 调脂通脉解毒方对脑梗死后神经功能的影响 |
| 4 调脂通脉解毒方对TLR4/NF-κB信号通路相关炎症因子的影响 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 血脂异常合并缺血性脑卒中患者不同证候间脑卒中分型及炎症因子水平特点研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 1 临床资料 |
| 2 研究方法 |
| 3 统计方法 |
| 结果 |
| 1 血脂异常合并缺血性脑卒中患者资料 |
| 2 各中医证候患者脑卒中病因分型(TOAST分型)特点 |
| 3 不同中医证候患者炎症因子差异比较 |
| 4 不同中医证候积分与炎症因子水平的相关性 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 附录 血脂异常合并缺血性脑卒中患者中医证型与炎症因子的临床研究 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（5）“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 缺血性脑卒中的研究进展 |
| 1.2 丹参-降香药对及其代谢产物的研究现状 |
| 1.3 缺血性脑卒中与血管内皮功能障碍 |
| 1.3.1 氧化应激和炎症反应 |
| 1.3.2 血管活性物质损伤机制 |
| 1.4 GTPCH1-BH4-eNOS-NO信号通路与缺血性脑卒中密切相关 |
| 1.5 缺血性脑损伤动物模型和细胞模型的研究现状 |
| 1.6 本论文研究内容与意义 |
| 第二章 香丹注射液及咖啡酸异丙酯抗脑缺血的药效学研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 药品与试剂 |
| 2.1.3 主要试剂配制方法 |
| 2.1.4 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物分组和给药 |
| 2.2.2 动物模型的制备 |
| 2.2.3 脑血流量的测定 |
| 2.2.4 脑梗死面积的测定 |
| 2.2.5 Western Bolt检测相关蛋白表达 |
| 2.2.6 统计学分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 对MCAO大鼠脑血流量的影响 |
| 2.3.2 对脑缺血大鼠脑梗死范围的影响 |
| 2.3.3 对IL-Iβ、NFκB及 HIF-1α蛋白表达的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 香丹注射液和咖啡酸异丙酯舒张血管作用的机制研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 主要试剂配置方法 |
| 3.1.4 仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 大脑中动脉血管环的制备 |
| 3.2.2 香丹注射液和KYB对中动脉血管作用的研究 |
| 3.2.3 Western Bolt检测eNOS和iNOS蛋白表达 |
| 3.2.4 ELISA检测大鼠脑组织中NO的含量 |
| 3.2.5 统计学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 香丹注射液和KYB对中动脉血管环内皮功能的影响 |
| 3.3.2 累积浓度的香丹注射液和KYB对正常中动脉血管环张力的影响 |
| 3.3.3 GTPCHI-BH4-eNOS通路中各靶点对香丹注射液和KYB舒血管作用的影响 |
| 3.3.4 对eNOS和iNOS蛋白表达的影响 |
| 3.3.5 对MCAO大鼠脑组织中NO含量的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 香丹注射液及咖啡酸异丙酯对细胞损伤的保护作用研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验细胞 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞培养 |
| 4.2.2 建立OGD模型及实验分组 |
| 4.2.3 OGD缺氧时间的选择 |
| 4.2.4 CCK-8检测药物对RBMEC细胞的毒性作用 |
| 4.2.5 Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡 |
| 4.2.6 Western Bolt检测RBMEC细胞中NFκB、eNOS和iNOS蛋白表达 |
| 4.2.7 RBMEC细胞NO含量的测定 |
| 4.2.8 DCFH-DA荧光探针检测活性氧的含量 |
| 4.2.9 统计学分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 OGD不同时间对RBMEC细胞凋亡率的影响 |
| 4.3.2 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞存活率的影响 |
| 4.3.3 香丹注射液和KYB对OGD6h诱导的RBMEC细胞凋亡率的影响 |
| 4.3.4 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞中相关蛋白表达的影响 |
| 4.3.5 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞中NO含量的影响 |
| 4.3.6 香丹注射液和KYB对RBMEC细胞内ROS水平的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（6）免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstracts |
| 缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 PTx引发的炎性反应对脑卒中动物模型的影响与机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组小鼠神经功能损伤情况 |
| 2.2 各组小鼠中枢免疫细胞浸润分布 |
| 2.3 各组小鼠脑氧化应激对比 |
| 2.4 各组小鼠血脑屏障染色 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 2型固有淋巴细胞对缺血性脑卒中动物模型的影响与机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 缺血性脑卒中后小鼠脑与外周ILC2数量变化 |
| 2.2 ILC2对缺血性脑卒中小鼠神经功能与脑梗死体积的影响 |
| 2.3 缺血性脑卒中后第3天小鼠少突胶质细胞是IL-33的主要来源 |
| 2.4 IL-33能够扩增ILC2细胞数量,减少缺血性脑卒中小鼠神经功能缺损与脑梗死体积 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 脑血管病的发病机制、诊断与治疗方面的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）基于活血谱效相关的三七质量评价研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 三七化学成分研究进展 |
| 1 皂苷类成分 |
| 2 氨基酸和蛋白质类成分 |
| 3 黄酮类成分 |
| 4 糖类成分 |
| 5 挥发性成分 |
| 6 微量元素 |
| 7 其他成分 |
| 8 小结与展望 |
| 综述二 三七活血功效临床应用及药理作用研究进展 |
| 1 在外周血液系统疾病中的应用 |
| 2 在心血管系统疾病中的应用 |
| 3 在脑血管系统疾病中的应用 |
| 4 在骨伤、外科类疾病中的应用 |
| 5 小结与展望 |
| 综述三 活血药物药理评价模型及其应用研究进展 |
| 1 体内活血药理模型 |
| 2 体外活血药理模型 |
| 3 小结与展望 |
| 综述四 三七活血药效物质基础及三七质量评价方法研究进展 |
| 1 三七活血作用药效物质基础研究进展 |
| 2 三七质量评价方法研究进展 |
| 3 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 第一章 三七药用资源现状调查及实验样品的收集与制备 |
| 第一节 广西、云南两省三七药用资源现状调查及实验样品的收集 |
| 1 调查方法 |
| 2 调查结果 |
| 3 小结 |
| 第二节 实验样品的制备 |
| 1 三七谱-效相关研究实验样品的制备 |
| 2 灰色关联分析实验样品的制备 |
| 3 小结 |
| 本章小结 |
| 第二章 三七药物谱的构建 |
| 第一节 三七HPLC指纹图谱的构建 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二节 14批次三七指纹图谱中共有成分的定量及半定量分析 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 本章小结 |
| 第三章 三七药效谱的获取 |
| 第一节 三七对大鼠毛细管凝血实验的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二节 三七对大鼠MCAO脑缺血再灌注损伤的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 本章小结 |
| 第四章 谱-效相关法筛选三七活血有效成分群 |
| 第一节 药物谱与毛细管凝血实验药效指标的相关性分析 |
| 1 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 第二节 药物谱与大鼠MCAO脑缺血再灌注损伤药效指标的相关性分析 |
| 1 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 第三节 药物谱与活血作用综合药效指标的相关性分析 |
| 1 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 本章小结 |
| 第五章 灰色关联分析法综合评价三七质量 |
| 第一节 50批次三七活血有效成分群的含量测定 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二节 灰色关联分析法构建三七质量评价模型 |
| 1 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 本章小结 |
| 全文总结及创新点 |
| 一 全文总结 |
| 1 三七资源调查及实验样品制备 |
| 2 三七药物谱的获取 |
| 3 三七药效谱的获取 |
| 4 谱-效相关法筛选三七活血有效成分群 |
| 5 灰色关联分析法构建三七质量综合评价模型 |
| 6 小结 |
| 7 展望 |
| 二 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在校期间主要研究成果 |
（8）心脑宁胶囊对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 ABSTRACT 英文缩略词表 前言 研究一 心脑宁胶囊对小鼠脑缺血/再灌注损伤药效学评价 |
| 实验一 小鼠MCAO模型的建立与行为学评分 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 实验二 Micro-CT在体评价缺血/再灌注损伤引起的脑水肿 |
| 1 材料和方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 实验三 心脑宁胶囊对小鼠脑缺血/再灌注损伤脑梗死体积的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 实验四 心脑宁胶囊对小鼠脑缺血/再灌注损伤组织病理学影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 研究二 网络药理学分析心脑宁胶囊抗缺血性卒中机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 研究三 心脑宁胶囊对小鼠脑缺血/再灌注损伤保护作用的机制研究 |
| 实验一 Western Blot检测脑组织内NF-κBp65蛋白的表达 |
| 1 材料和方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 实验二 心脑宁胶囊对缺血再灌注损伤小鼠脑组织NF-κB表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 |
| 实验三 RT-PCR检测小鼠脑组织IL-1β,IL-6,TNF-α炎症因子mRNA水平 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 小结 讨论 结论 参考文献 综述 心源性卒中中医药研究进展 |
| 参考文献 致谢 个人简历 |
（9）基于代谢组学探索大黄黄连泻心汤抗脑缺血的分子作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究的目的和意义 |
| 1.2 急性脑缺血研究进展 |
| 1.2.1 急性脑缺血的流行趋势 |
| 1.2.2 急性脑缺血的病理研究 |
| 1.2.3 急性脑缺血机制研究 |
| 1.2.4 药物在急性脑缺血中的应用 |
| 1.3 大黄黄连泻心汤的研究进展 |
| 1.3.1 大黄黄连泻心汤的来源 |
| 1.3.2 大黄泻心汤的药理作用 |
| 1.4 代谢组学研究进展 |
| 1.4.1 代谢组学技术来源及应用范围 |
| 1.4.2 代谢组学研究方法与技术手段 |
| 1.4.3 代谢组学技术在中药中的应用 |
| 1.5 研究内容 |
| 2 大黄黄连泻心汤抗脑缺血的药效学研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验药品 |
| 2.2.3 实验试剂与仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 大黄黄连泻心汤的制备 |
| 2.3.2 分组及干预 |
| 2.3.3 局灶脑缺血小鼠模型的建立 |
| 2.3.4 神经功能行为学评分 |
| 2.3.5 TTC染色测定脑梗死面积 |
| 2.3.6 脑含水量测定 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 神经功能行为学评分 |
| 2.4.2 脑缺血面积测定 |
| 2.4.3 脑含水量测定 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 大黄黄连泻心汤对局灶脑缺血小鼠血清干预作用的代谢组学研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验试剂与仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 分组及干预 |
| 3.3.2 局灶脑缺血小鼠模型的建立 |
| 3.3.3 样品采集与存储 |
| 3.3.4 样品前处理 |
| 3.3.5 衍生化 |
| 3.3.6 气相色谱条件 |
| 3.3.7 质谱条件 |
| 3.3.8 质量控制 |
| 3.3.9 代谢物鉴定与数据处理 |
| 3.4 数据结果与分析 |
| 3.4.1 代谢物鉴定举例 |
| 3.4.2 疾病模型可行性分析 |
| 3.4.3 四组血清样本主成分分析 |
| 3.4.4 四组血清样本PLS-DA和o PLS-DA分析 |
| 3.4.5 血清中差异代谢物 |
| 3.4.6 差异代谢物的聚类分析 |
| 3.4.7 代谢通路分析 |
| 3.4.8 代谢组学网络的构建及潜在靶点预测 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 大黄黄连泻心汤对局灶脑缺血小鼠脑组织干预作用的代谢组学研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验试剂与仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 分组及干预 |
| 4.3.2 局灶脑缺血小鼠模型的建立 |
| 4.3.3 样品采集与存储 |
| 4.3.4 样品前处理 |
| 4.3.5 衍生化 |
| 4.3.6 气相色谱条件 |
| 4.3.7 质谱条件 |
| 4.3.8 质量控制 |
| 4.3.9 代谢物鉴定与数据处理 |
| 4.4 数据结果与分析 |
| 4.4.1 假手术组与模型组对比分析 |
| 4.4.2 四组脑组织样本主成分分析 |
| 4.4.3 四组脑组织样本PLS-DA和 o PLS-DA分析 |
| 4.4.4 脑组织中差异代谢物 |
| 4.4.5 差异代谢物的聚类分析 |
| 4.4.6 代谢通路分析 |
| 4.4.7 代谢组学网络的构建及潜在靶点预测 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 大黄黄连泻心汤抗脑缺血作用的药效学研究 |
| 5.2 大黄黄连泻心汤对局灶脑缺血小鼠血清和脑组织干预作用代谢组学研究 |
| 结论 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）通脑丸治疗痰瘀阻络型缺血性脑卒中恢复期的临床观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 病例剔除、脱落及终止标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 样本量估计 |
| 2.2 分组方法 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 观察项目与指标 |
| 2.5 疗效判定 |
| 2.6 研究记录 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 基础资料表述 |
| 3.2 治疗前2组基础资料比较 |
| 3.3 治疗后2组疗效比较 |
| 3.4 安全性评价 |
| 4 讨论 |
| 4.1 刘国安教授治疗缺血性脑卒中的学术思想 |
| 4.2 通脑丸的处方组成及方药解析 |
| 4.3 单味药现代药理研究 |
| 4.4 对照药物的选择 |
| 4.5 疗效观测指标的选择 |
| 4.6 通脑丸治疗缺血性脑卒中恢复期的疗效分析 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 第二部分 文献综述 |
| 1 缺血性脑卒中的西医研究进展 |
| 2 缺血性脑卒中的中医研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在校期间主要研究成果 |
四、抗脑水肿药物对脑梗死作用的影像效果评价（论文参考文献）
- [1]基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究[D]. 姜海伟. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响[D]. 李中浩. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究[D]. 欧阳波. 湖南中医药大学, 2021(02)
- [4]调脂通脉解毒方对高脂血症合并脑梗死大鼠TLR4/NF-κB通路的影响及证候研究[D]. 李中康. 北京中医药大学, 2021(01)
- [5]“良关系”丹参-降香药对效应物质咖啡酸异丙酯抗脑缺血作用机制的研究[D]. 田佳乐. 西北大学, 2021(12)
- [6]免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究[D]. 赵慧. 山西医科大学, 2020(01)
- [7]基于活血谱效相关的三七质量评价研究[D]. 丁永胜. 北京中医药大学, 2020(04)
- [8]心脑宁胶囊对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D]. 任杰. 天津中医药大学, 2020(04)
- [9]基于代谢组学探索大黄黄连泻心汤抗脑缺血的分子作用机制[D]. 祁琳. 哈尔滨商业大学, 2020(12)
- [10]通脑丸治疗痰瘀阻络型缺血性脑卒中恢复期的临床观察[D]. 刘智美. 甘肃中医药大学, 2020(12)